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选用组织研磨仪研磨小鼠皮肤组织高效提取RNA

在研究动物基因或某些人类遗传疾病基因的过程中,常需要分析基因的转录酶mRNA,首先要从动物组织中提取mRNA,以便精制mRNA。小鼠是常用的实验动物。
在制作小鼠皮肤组织样品的时候,会发现皮肤组织韧性特别高。皮肤富含纤维组织和弹性,要从这类组织有效提取RNA是非常困难的,因此完全研磨这些组
织是十分具有挑战性的。传统的人工或用手持式匀浆器来研磨不仅费时,研磨后的效果也不尽人意比较差,RNA产量低且令样本发热,那么我们的组织研磨仪会
有什么不同的效果呢?

大、小鼠皮肤组织提取DNA、RNA是目前各高校实验室的一项难题。经过多个试用比较,选择研磨仪来处理小鼠皮肤组织。
本次实验对象为小鼠去毛后处理过的皮肤,要求磨细一点,提高RNA的浓度,涉及到RNA提取还需要低温研磨,因为有提取液,所以温度不能太低,否则冻
住液体无法研磨。
 实验步骤:

1、准备金属适配器一套,离心管和研磨珠若干。

2、预冷模块,把金属适配器放到液氮或冰箱中预冷(不用的时候顺手把模块放入-20冰箱,即可省去预冷步骤)

3、取适量小鼠皮肤组织、研磨珠、提取液一起放入离心管中,每管加三到五颗研磨珠,盖子盖上。

4、将完成预冷后的金属模块取出,放入研磨仪中固定(适配器底部与轴的卡槽互相卡牢)放平后将离心管分别放入适配器对应孔位,(注意平面配平,对称放样)盖上适配器盖,旋紧螺帽。

5、设置好参数(根据组织类型以及量微调),开始研磨。

6、磨好后打开仪器取出离心管,即可进行后续实验。

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